Ujian endotoksin bakteria (BET) dilakukan di kebanyakan makmal moden di bawah keadaan terkawal sebagai faktor penting untuk mengelakkan gangguan.
Sesuaiteknik aseptikadalah penting semasa menyediakan dan mencairkan piawaian dan mengendalikan sampel.Berpakaianberlatih di luar peralatan pelindung diri makmal biasa (PPE) keperluan tidak menjadi kebimbangan melainkan produk yang diuji memerlukan pertimbangan keselamatan penganalisis khusus disebabkan oleh ketoksikan atau kejangkitan.Sarung tanganhendaklah bebas TALC, kerana TALC mungkin mengandungi tahap endotoksin yang ketara.Pembaca plat, mandi air, dan blok haba keringdigunakan untuk pengeraman sampel hendaklah berada di bangku makmal yang jauh dari saluran pemanasan, pengudaraan dan penyaman udara (HVAC), getaran ketara dan trafik makmal yang boleh menjejaskan keputusan ujian.Contoh masa dan syarat penahananhendaklah ditentukan dan kemudiannya didokumenkan, jika perlu, untuk memastikan keputusan ujian yang tepat dapat dijana dalam masa yang layak.
Sebagai contoh, jika makmal menerima sampel Air untuk Suntikan (WFI) atau dalam proses, mestikah ia disejukkan atau bolehkah ia kekal pada suhu bilik, dan untuk berapa lama?Sebelum ujian, adalah disyorkan bahawa bekas sampel utama dicampur secukupnya sebelum mengeluarkan aliquot ujian sama ada untuk ujian langsung atau pencairan berikutnya.
Ujian Endotoksin Bakteria Bioendo, eksperimen termasukkaedah pembekuan gelujian ujian endotoksin danujian ujian endotoksin kuantitatif, kaedah pembekuan gel ujian ujian endotoksin adalah pengesanan endotoksin kualitatif, eksperimen ini memerlukan bahan habis adalah pemprosesan depirogenasi, seperti tiub tindak balas bebas endotoksin, tiub pencairan dan petua bebas pirogen;pengesanan endotoksin kuantitatif mempunyai ujian endotoksin kromogenik kinetik, ujian endotoksin turbidimetrik kinetik, eksperimen ini memerlukan bahan habis guna perlu memenuhi tahap tertinggi endotoksin kurang daripada0.005EU/ml( 0.001EU/ml ), seperti tiub bebas endotoksin, petua bebas pirogen, dan plat mikro bebas pirogen, malah takungan bebas pirogen.Dengan cara ini, jika rawatan sampel, bekas itu mestilah botol sampel bebas endotoksin.
Dalam ujian endotoksin, gangguan boleh timbul daripada pelbagai sumber, seperti komponen matriks sampel, reagen ujian, atau peralatan.
Untuk mengelakkan gangguan eksperimen, langkah-langkah berikut boleh diambil:
1. Penyediaan Sampel: Penyediaan sampel yang betul adalah penting untuk ujian endotoksin yang tepat.
Matriks sampel hendaklah diuji dan dioptimumkan secara menyeluruh untuk memastikan keserasian dengan ujian endotoksin.
Khususnya, bahan yang mengganggu seperti lipid dan protein harus dikeluarkan atau diminimumkan menggunakan teknik yang sesuai seperti penapisan atau sentrifugasi.
2. Kawalan Positif dan Negatif: Adalah penting untuk memasukkan kawalan positif dan negatif dalam ujian untuk memantau gangguan.
Kawalan positif mengesahkan kefungsian ujian, manakala kawalan negatif mengesan sebarang pencemaran atau gangguan daripada komponen ujian.
3. Kawalan Kualiti: Kawalan kualiti hendaklah dilakukan pada semua reagen, peralatan dan air yang digunakan dalam ujian.
Ini memastikan bahawa reagen bebas daripada pencemaran endotoksin dan berfungsi dengan betul.
4. Penyeragaman: Ujian harus diseragamkan untuk memastikan bahawa semua keputusan adalah setanding dan boleh dihasilkan semula.
Ini melibatkan penggunaan lengkung piawai untuk menentukur ujian dan penggunaan teknik piawai untuk penyediaan sampel, pengeraman dan pengesanan.
5. Pengesahan: Ujian hendaklah disahkan untuk memastikan ia khusus, sensitif dan boleh dipercayai.
Ini melibatkan ujian pelbagai sampel, termasuk yang diketahui mengandungi endotoksin, untuk menentukan ketepatan dan ketepatan ujian.
Dengan mengikuti langkah-langkah ini, gangguan boleh diminimumkan, dan ujian endotoksin yang tepat boleh dicapai.
Masa siaran: Dis-01-2022
