Apakah Ujian Endotoksin?

Apakah Ujian Endotoksin?

Endotoksin ialah molekul hidrofobik yang merupakan sebahagian daripada kompleks lipopolisakarida yang membentuk sebahagian besar membran luar bakteria Gram-negatif.Ia dibebaskan apabila bakteria mati dan membran luarnya hancur.Endotoksin dianggap sebagai penyumbang utama kepada tindak balas pirogenik.Dan produk parenteral yang tercemar dengan pirogen boleh menyebabkan perkembangan demam, induksi tindak balas keradangan, kejutan, kegagalan organ dan kematian pada manusia.

Ujian endotoksin ialah ujian untuk mengesan atau mengukur endotoksin daripada bakteria Gram-negatif.

Arnab digunakan untuk mengesan dan mengira endotoksin dalam produk farmaseutikal pada mulanya.Menurut USP, RPT melibatkan pemantauan untuk peningkatan suhu atau demam selepas suntikan intravena farmaseutikal ke dalam arnab.Dan 21 CFR 610.13(b) memerlukan ujian pirogen arnab untuk produk biologi tertentu.

Pada tahun 1960-an, Fredrick Bang dan Jack Levin mendapati bahawa amebosit ketam ladam akan membeku dengan kehadiran endotoksin.TheLimulus Amebocyte Lysate(atau Tachypleus Amebocyte Lysate) telah dibangunkan dengan sewajarnya untuk menggantikan kebanyakan RPT.Pada USP, ujian LAL dirujuk sebagai ujian endotoksin bakteria (BET).Dan BET boleh dilakukan dengan menggunakan 3 teknik: 1) teknik pembekuan gel;2) teknik turbidimetrik;3) teknik kromogenik.Keperluan untuk ujian LAL mengandungi pH optimum, kekuatan ionik, suhu dan masa pengeraman.

Berbanding dengan RPT, BET adalah pantas dan cekap.Walau bagaimanapun, BET tidak dapat menggantikan RPT sepenuhnya.Kerana ujian LAL mungkin diganggu oleh faktor dan ia tidak dapat mengesan pirogen bukan endotoksin.